產 品 名 稱 | 第一鏈cDNA合成預混體系Master Premix(For qPCR) RT EasyTM II | |||
貨 號 | RT-01022 | RT-01023 | ||
規 格 | 200 × 10 μL rxns | 800 × 10 μL rxns | ||
價 格 | ¥628.00 | ¥2,371.00 | ||
描 述 | 本產品是專門為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。 本產品是專門為Real Time PCR研制的逆轉錄體系,預混優化配比的反轉錄引物(Oligo(dT)引物和隨機引物),無需單獨添加。 |
產品介紹
本公司的2× RT OR-EasyTM Mix合成第一鏈cDNA的溫度高達50℃,有利于復雜二級結構RNA模板進行逆轉錄反應。
實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留,對大多數逆轉錄酶有很強的抑制性,導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。福際2× RT Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性,對RNA樣品中酒精的最高耐受為60%,胍鹽的最高耐受為750mM。即使不純的RNA也可用福際2× RT OR-EasyTM Mix進行逆轉錄反應。
2×RT OR-EasyTM Mix是專為Real Time PCR而研發的快速逆轉錄試劑,該體系逆轉錄效率高,無需添加任何引物,可對少量RNA模板進行良好的逆轉錄反應。獨特的反應體系,使得RT反應更加簡便、快捷、高效,20min即可完成第一鏈cDNA合成。此產品可與Foregene公司的熒光定量產品Real Time PCR EasyTM 配合使用,能獲得高質量的實驗結果。
試劑盒應用
v 直接用于RealTime PCR定量分析基因的表達。
v 可以快速、準確地對RNA病毒等微量RNA進行分析。
v 高GC含量或具有復雜二級結構RNA模板的逆轉錄。
儲存條件
試劑盒保存于-20℃。產品收到后立即存放于-20℃恒溫冰箱中。如果存儲條件適當,產品在1年有效期內不會降低任何性能。
劑盒內容
2× RT OR-EasyTM Mix:Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、dNTPs、穩定劑、增強劑、優化劑及優化配比的逆轉錄引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。
Foregene Reverse Transcriptase
Foregene逆轉錄酶能夠提供高效、特異性強的逆轉錄反應。逆轉錄酶表現出很高的親和力,并在 50°C反應溫度條件下仍然保持良好的逆轉錄活性,能夠很好的逆轉錄其他逆轉錄酶不能處理的二級結構復雜的RNA。Foregene Reverse Transcriptase 靈敏度高,使用的RNA 量范圍廣泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。
RT Mix耐受性
經測試分析,2× RT OR-EasyTM Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性。實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留,對逆轉錄有很強的抑制性,導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。Foregene RT Easy系列產品對酒精及胍鹽的耐受能力使得逆轉錄更容易、高效率的進行。
酒精耐受性分析
胍鹽耐受性分析
RNA模板濃度
(0.1pg-0.5μg totalRNA or 0.01pg-0.05μg mRNA) /10 μL體系。
說明書
產品文獻
Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao
貴州省畢節第一人民醫院兒科
Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537
文章鏈接://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537
MSDS
COA
非特異性擴增
Answer
1. 引物設計不合理
建議:按照引物設計原則進行引物的設計。
2. 基因組殘留。
建議:使用含有基因組去除的逆轉錄試劑盒如(Cat.No.RH-01031)或者設計跨內含子引物。
RT-QPCR無擴增信號
Answer
1. RNA被降解。
建議:提取RNA的材料盡量新鮮,應用高質量高純的的RNA。
2. RNA含有抑制劑。
建議:逆轉錄抑制劑一般包括SDS、胍鹽、EDTA等,建議通過70%的乙醇對RNA沉淀進行清洗,除去抑制劑。
3. 引物設計問題。
建議:按照引物設計原則,重新設計引物進行檢查。
空白對照出現目的條帶
Answer
1. 操作工具或試劑污染。
建議:實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔,防止將DNA樣品吸入加樣槍內或濺出離心管外。
2. PCR反應體系制備時發生污染。
建議:操作時進行必要的防護措施,比如:戴乳膠手套,使用帶濾芯的槍頭。使用防污染體系的real time PCR Mix。
3. 引物出現降解。
建議:使用SDS-PAGE電泳檢測引物是否發生降解,更換新的引物進行熒光檢測實驗。
本產品是專門為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。5× gDNase Mix能在42°C,2min快速去除RNA中殘留的基因組,有效的避免了基因組對qPCR結果的干擾。
本產品是專門為LncRNA研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。
便捷的逆轉錄預混體系Master Premix,逆轉錄產物適用于克隆全長cDNA,qPCR等。