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中國福際,World’s Foregene

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第一鏈cDNA合成預混體系Master Premix(For qPCR)

高效的逆轉錄體系,只需20min即可完成第一鏈cDNA的合成。

高靈敏的逆轉錄體系,pg級別的模板也可以得到高質量的cDNA。

逆轉錄體系熱穩定性高,該體系反應溫度可高達50℃,具有良好的逆轉錄性能。

即使不純的RNA樣品(酒精可達60%,胍鹽可達750mM)也可進行逆轉錄反應。

2× RT OR-EasyTM Mix已添加了優化配比的逆轉錄引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。

產 品 名 稱

第一鏈cDNA合成預混體系Master Premix(For qPCR)

RT EasyTM II

貨    號

RT-01022

RT-01023

規    格

200 × 10 μL rxns

800  × 10 μL rxns

價    格

¥628.00

2,371.00

描    述

本產品是專門為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。

本產品是專門為Real Time PCR研制的逆轉錄體系,預混優化配比的反轉錄引物(Oligo(dT)引物和隨機引物),無需單獨添加。

產品介紹

本公司的2× RT OR-EasyTM Mix合成第一鏈cDNA的溫度高達50,有利于復雜二級結構RNA模板進行逆轉錄反應。

實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留,對大多數逆轉錄酶有很強的抑制性,導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。福際2× RT Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性,RNA樣品中酒精的最高耐受為60%胍鹽的最高耐受為750mM。即使不純的RNA也可用福際2× RT OR-EasyTM Mix進行逆轉錄反應。

2×RT OR-EasyTM Mix是專為Real Time PCR而研發的快速逆轉錄試劑,該體系逆轉錄效率高,無需添加任何引物,可對少量RNA模板進行良好的逆轉錄反應。獨特的反應體系,使得RT反應更加簡便、快捷、高效,20min即可完成第一鏈cDNA合成。此產品可與Foregene公司的熒光定量產品Real Time PCR EasyTM 配合使用,能獲得高質量的實驗結果。


試劑盒應用

v 直接用于RealTime PCR定量分析基因的表達

v 可以快速、準確地對RNA病毒等微量RNA進行分析

v GC含量或具有復雜二級結構RNA模板的逆轉錄


儲存條件

試劑盒保存于-20。產品收到后立即存放于-20恒溫冰箱中。如果存儲條件適當,產品在1年有效期內不會降低任何性能。



劑盒內容

2× RT OR-EasyTM MixForegene Reverse TranscriptaseRNase InhibitordNTPs、穩定劑、增強劑、優化劑及優化配比的逆轉錄引物(Random PrimerOligo(dT)18 Primer)


Foregene Reverse Transcriptase

Foregene逆轉錄酶能夠提供高效、特異性強的逆轉錄反應。逆轉錄酶表現出很高的親和力,并在 50°C反應溫度條件下仍然保持良好的逆轉錄活性,能夠很好的逆轉錄其他逆轉錄酶不能處理的二級結構復雜的RNAForegene Reverse Transcriptase 靈敏度高,使用的RNA 量范圍廣泛(0.1pg≤RNA≤1μg)


RT Mix受性

經測試分析,2× RT OR-EasyTM Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性。實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留,對逆轉錄有很強的抑制性,導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。Foregene RT Easy系列產品對酒精及胍鹽的耐受能力使得逆轉錄更容易、高效率的進行

酒精耐受性分析


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胍鹽耐受性分析


12

RNA模板濃度

(0.1pg-0.5μg totalRNA or 0.01pg-0.05μg mRNA) /10 μL體系



  • 說明書

  • 產品文獻

    Association between inflammatory-response gene polymorphisms and risk of acute kidney injury in children Jing He, Guoyan Xie, Hui Wu, Song Xu, Jun Xie, Youyuan Chen, Xinqian Zhao

    貴州省畢節第一人民醫院兒科

    Bioscience Reports ( IF 2.899 ) Pub Date : 2018-12 , DOI: 10.1042/BSR20180537

    文章鏈接://www.bioscirep.org/content/38/6/BSR20180537

  • MSDS

  • COA

  • 非特異性擴增

    Answer

    1.    引物設計不合理

    建議:按照引物設計原則進行引物的設計。

    2.    基因組殘留。

    建議:使用含有基因組去除的逆轉錄試劑盒如(Cat.No.RH-01031)或者設計跨內含子引物。


  • RT-QPCR無擴增信號

    Answer

    1.     RNA被降解。

    建議:提取RNA的材料盡量新鮮,應用高質量高純的的RNA

    2.    RNA含有抑制劑。

    建議:逆轉錄抑制劑一般包括SDS、胍鹽、EDTA等,建議通過70%的乙醇對RNA沉淀進行清洗,除去抑制劑。

    3.    引物設計問題。

    建議:按照引物設計原則,重新設計引物進行檢查。


  • 空白對照出現目的條帶

    Answer

    1.    操作工具或試劑污染。

    建議:實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔,防止將DNA樣品吸入加樣槍內或濺出離心管外。

    2.    PCR反應體系制備時發生污染。

    建議:操作時進行必要的防護措施,比如:戴乳膠手套,使用帶濾芯的槍頭。使用防污染體系的real time PCR Mix

    3.    引物出現降解。

    建議:使用SDS-PAGE電泳檢測引物是否發生降解,更換新的引物進行熒光檢測實驗。


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COA