產 品 名 稱 | 第一鏈cDNA合成預混體系Master Premix RT EasyTM I | ||
貨 號 | RT-01011 | RT-01012 | |
規 格 | 25 × 20 μL rxns | 100 × 20 μL rxns | |
價 格 | ￥424.00 | ￥1,456.00 | |
| 描 述 | 便捷的逆轉錄預混體系Master Premix，逆轉錄產物適用于克隆全長cDNA，qPCR等。 | ||
產品介紹
本公司的2× RT EasyTM Mix合成第一鏈cDNA的溫度高達50℃，有利于復雜二級結構RNA模板進行逆轉錄反應。
實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留，對大多數逆轉錄酶有很強的抑制性，導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。福際2× RT EasyTM Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性，對RNA樣品中酒精的最高耐受為45%，胍鹽的最高耐受為750mM。即使不純的RNA也可用福際2× RT Mix進行逆轉錄反應。獨特的反應體系,使得RT反應更加簡便、快捷、高效，25min即可完成第一鏈cDNA的合成。
此產品可與Foregene公司的熒光定量產品Real Time PCR EasyTM 配合使用，能獲得高質量的實驗結果。
試劑盒應用
v 常規RT-PCR。
v 合成cDNA，用于克隆和表達研究。
v 轉錄起始位點的引物延伸法分析。
v RACE(cDNA末端快速擴增)。
v 線性RNA擴增。
v 芯片標記。
儲存條件
試劑盒保存于-20℃。產品收到后立即存放于-20℃恒溫冰箱中。如果存儲條件適當，產品在1年有效期內不會降低任何性能。
劑盒內容
2× RT EasyTM Mix：Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、dNTPs、反應緩沖液、優化劑和穩定劑等。
Random Primer (50μM)：6個寡聚核苷酸的隨機引物，其濃度為50μM。
Oligo(dT)18 Primer (50μM)：具有18個dT的引物，其濃度為50μM。
Foregene Reverse Transcriptase
Foregene逆轉錄酶能夠提供高效、特異性強的逆轉錄反應。逆轉錄酶表現出很高的親和力，并在 50°C反應溫度條件下仍然保持良好的逆轉錄活性，能夠很好的逆轉錄其他逆轉錄酶不能處理的二級結構復雜的RNA。Foregene Reverse Transcriptase 靈敏度高，使用的RNA 量范圍廣泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。
RT Mix耐受性
經測試分析，2× RT EasyTM Mix對酒精和胍鹽顯示出極高的耐受性。實驗室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留，對逆轉錄有很強的抑制性，導致逆轉錄效果不理想或逆轉錄效率低。Foregene RT Easy系列產品對酒精及胍鹽的耐受能力使得逆轉錄更容易、高效率的進行。
酒精耐受性分析
胍鹽耐受性分析
RNA模板濃度
(0.1pg-5μg total RNAor 0.01pg-0.5μg mRNA) /20 μL體系。
說明書
產品文獻
MiR-610 functions as a tumor suppressor in oral squamous cell carcinoma by directlytargeting AGK
L.-X. YAO, J. LIU, L. XU
山東省聊城市人民醫院口腔外科
European Review for Medical and Pharmacological Sciences ( IF 2.387 ) Pub Date : 2019, DOI：10.26355/eurrev_201901_16764
文章鏈接：
MSDS
COA
非特異性擴增
Answer
1. 引物設計不合理
建議：按照引物設計原則進行引物的設計。
2. 基因組殘留。
建議：使用含有基因組去除的逆轉錄試劑盒如(Cat.No.RH-01031)或者設計跨內含子引物。
RT-QPCR無擴增信號
Answer
1. RNA被降解。
建議：提取RNA的材料盡量新鮮，應用高質量高純的的RNA。
2. RNA含有抑制劑。
建議：逆轉錄抑制劑一般包括SDS、胍鹽、EDTA等，建議通過70%的乙醇對RNA沉淀進行清洗，除去抑制劑。
3. 引物設計問題。
建議：按照引物設計原則，重新設計引物進行檢查。
空白對照出現目的條帶
Answer
1. 操作工具或試劑污染。
建議：實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔，防止將DNA樣品吸入加樣槍內或濺出離心管外。
2. PCR反應體系制備時發生污染。
建議：操作時進行必要的防護措施，比如：戴乳膠手套，使用帶濾芯的槍頭。使用防污染體系的real time PCR Mix。
3. 引物出現降解。
建議：使用SDS-PAGE電泳檢測引物是否發生降解，更換新的引物進行熒光檢測實驗。
本產品是專門為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。5× gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中殘留的基因組，有效的避免了基因組對qPCR結果的干擾。
本產品是專門為Real Time PCR研制的逆轉錄體系，預混優化配比的反轉錄引物（Oligo(dT)引物和隨機引物），無需單獨添加。
本產品是專門為LncRNA研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。
