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中國福際,World’s Foregene

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去基因組LncRNA專用第一鏈cDNA合成預混體系Super Premix(For LncRNA)

高效的去gDNA能力,能在2min內去除模板中的gDNA。

對lncRNA能高效逆轉錄,逆轉錄產物進行qPCR時,比常規逆轉錄體系Ct值低。

高效的逆轉錄體系,只需15min即可完成第一鏈cDNA的合成。

復雜模板:GC含量較高和二級結構復雜模板亦能得到很高效率的逆轉。

高靈敏的逆轉錄體系,pg級別的模板也可以得到高質量的cDNA。

逆轉錄體系熱穩定性高,最適反應溫度為42℃,在50℃仍具有良好的逆轉錄性能。

產 品 名 稱

去基因組LncRNA專用第一鏈cDNA合成預混體系

Lnc-RT HeroTM I(With gDNase)

貨    號

RTL-09098

RTL-09099

規    格

25 × 20 μL rxns

50  × 20 μL rxns

價    格

949.00

1,522.00

描    述

本產品是專門為LncRNA研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。

5× gDNase Mix能在42°C,2min快速去除RNA中殘留的基因組,有效的避免了基因組對qPCR結果的干擾。

產品介紹

Lnc-RT HeroTM I(With gDNase)是專門為lncRNA研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉錄體系。5× gDNase Mix能在42°C2min快速去除RNA中殘留的基因組,有效的避免了基因組對qPCR結果的干擾。

5× L-RT HeroTM Mix內含福際專門研制的Foregene LncRNA Reverse Transcriptase是一款專門針對lncRNA等長RNA復雜模板的新型反轉錄酶,具有更強的RNA親和性和更高的逆轉錄效率。優化后的體系使得逆轉錄速率更快,能輕松的轉錄GC含量高、二級結構復雜的RNA模板,42°C15min即可完成第一鏈cDNA的合成。


試劑盒應用

v lncRNA 相對定量分析

v lncRNA絕對定量分析

v 可以快速、準確地對RNA病毒等微量RNA進行分析

v GC含量或具有復雜二級結構RNA模板的逆轉錄


儲存條件

試劑盒保存于-20。產品收到后立即存放于-20恒溫冰箱中。如果存儲條件適當,產品在1年有效期內不會降低任何性能。


試劑盒內容

5× gDNase MixgDNA去除劑,在進行RT反應前務必按照操作說明使用該試劑(內部甘油含量較高,-20以上可能不會結冰,屬于正常現象)

5× L-RT HeroTM Mix包含福際生物專門研制的Foregene LncRNA Reverse TranscriptaseRNase InhibitordNTPs、穩定劑、增強劑、優化劑及優化配比的逆轉錄引物(Random PrimerOligo(dT)18 Primer)


Foregene Reverse Transcriptase

Foregene LncRNA逆轉錄酶能夠提供高效、特異性強的逆轉錄反應。逆轉錄酶表現出很高的親和力,并在 50°C反應溫度條件下仍然保持良好的逆轉錄活性,能夠很好的逆轉錄其他逆轉錄酶不能處理的二級結構復雜的RNAForegene ReverseTranscriptase 靈敏度高,使用的RNA 量范圍廣泛(0.1pg≤RNA≤1μg)


RNA模板濃度

v For lncRNA10ng-1μg total RNA/20μL體系。

v For general RNA0.1pg-1μg total RNA or 0.01pg-0.1μg mRNA/20μL體系

  • 非特異性擴增非特異性擴增

    Answer

    1.    引物設計不合理

    建議:按照引物設計原則進行引物的設計。

    2.    基因組殘留。

    建議:確定第一步gDNA去除反應溫度為42°C,也可延長反應時間至5min


  • RT-QPCR無擴增信號

    Answer

    1.     RNA被降解。

    建議:提取RNA的材料盡量新鮮,應用高質量高純的的RNA

    2.    RNA含有抑制劑。

    建議:逆轉錄抑制劑一般包括SDS、胍鹽、EDTA等,建議通過70%的乙醇對RNA沉淀進行清洗,除去抑制劑。

    3.    引物設計問題。

    建議:按照引物設計原則,重新設計引物進行檢查。


  • 空白對照出現目的條帶

    Answer

    1.    操作工具或試劑污染。

    建議:實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔,防止將DNA樣品吸入加樣槍內或濺出離心管外。

    2.    PCR反應體系制備時發生污染。

    建議:操作時進行必要的防護措施,比如:戴乳膠手套,使用帶濾芯的槍頭。使用防污染體系的Real Time PCR Mix

    3.    引物出現降解。

    建議:使用SDS-PAGE電泳檢測引物是否發生降解,更換新的引物進行熒光檢測實驗。


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