產品介紹

本產品采用獨特的裂解反應體系，能夠快速的從多糖多酚含量高的植物種子樣本(如：香蕉、棉花等)中釋放出基因組DNA，用于PCR反應，因此特別適合大規模基因檢測。為了滿足不同檢測試驗的需要，本試劑盒可以使用多種類型的樣本(如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本)進行實驗。其中，對于還需要進行萌發的種子樣本，可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進行實驗；對于需要在大量樣本中進行抽樣檢測的實驗，可以選擇將多個樣本混合并磨碎成直徑0.5mm左右的顆粒后再進行實驗(最低可以檢測出0.1%的目的樣本)。

裂解反應體系釋放基因組DNA過程可以在5-10min內完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產物的過程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進行PCR反應。

2× Seed PCR Easy^TM Mix具有很強的PCR反應抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解混合液為模板，進行高效特異性擴增。該試劑包含公司專門針對直接PCR改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑和穩定劑。與裂解反應體系配合使用能夠快速簡便地對樣品進行檢測，并具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。

D-Taq DNA polymerase是Foregene為直接PCR反應專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對多種PCR反應抑制劑具有極強的的耐受性、在各種復雜反應體系中均能高效擴增痕量的DNA，擴增速度可達2Kb/min，特別適合進行直接PCR反應。

根據植物樣本差異，該產品分為兩個大類：植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Kit)和多糖多酚植物種子直接PCR試劑盒(Plant Seed Direct PCR Plus Kit)。在裂解階段，考慮到不同類型的種子或組織材料在裂解過程中試劑用量差異較大，客戶可根據自己實驗材料的大小選擇相應的植物種子(中小型)直接PCR試劑盒或植物種子(大型)直接PCR試劑盒；在PCR檢測階段，客戶也可以根據實驗需求，選用普通的2× Seed PCR Easy^TM Mix或是具有防PCR擴增產物污染作用的2× Seed PCR Easy^TM Mix(UNG)。

試劑盒應用

適用范圍：多種植物種子。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉基因種子鑒定、植物基因分型等。

試劑盒局限性

擴增片段≤1kb；超過1kb，擴增效率下降或者擴增失敗。

PCR產物如用于測序建議先進行PCR產物純化。

PCR產物可能會有點突變，如用于基因克隆，請知悉。

PCR產物3’末端隨機加A尾。

試劑盒內容

Buffer SSP1：提供多糖多酚植物種子裂解反應所需的環境。

Buffer SSP2：補充提供多糖多酚植物種子裂解反應所需的環境。

Buffer SP2：中和裂解產物，使其不影響后續PCR反應。

2× Seed PCR Easy^TM Mix：包含福際生物特別改造的Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR反應時，只需將適當的裂解混合液、引物、ddH₂O添加到2× Leaf PCR Easy^TM Mix中即可用于PCR反應。

6× DNA Loading Buffer：該Loading Buffer中不含有SDS。建議在進行瓊脂糖凝膠電泳時，配搭使用試劑盒附贈的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否則在電泳時會在泳道中有一大團拖尾亮光，影響實驗結果。

儲存條件

全程低溫冰盒運輸，保證試劑盒Part I、Part II處于＜4℃狀態。

本試劑盒Part I保存在2-8℃。

v 試劑Buffer PS1、Buffer P2、6× DNA Loading Buffer在干燥條件下，可保存12個月；如需保存更長時間可置于2–8℃。

本試劑盒Part II保存在-20℃。

v  試劑Buffer PS2、2× Seed PCR Easy^TM Mix，在-20℃條件下可保存12個月；若頻繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天內用完)。

操作流程