產品介紹

本產品采用獨特的裂解緩沖液體系，能夠快速的從多糖多酚含量高的植物(如：棉花、香蕉等)葉片樣本中釋放出基因組DNA，用于PCR反應。裂解緩沖液處理葉片時，葉片無需研磨或剪碎處理，因此特別適合大規模基因檢測。

裂解緩沖液釋放基因組DNA過程可以在5-10min內完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產物的過程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進行PCR反應。

2× Leaf PCR Easy^TM Mix具有很強的PCR反應抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解產物為模板，進行高效特異性擴增。該試劑包含公司專門針對直接PCR反應改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑和穩定劑。與直接裂解液配合使用能夠快速簡便地對樣品進行檢測，并具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。

2× Leaf PCR Easy^TM Mix(UNG)在2× Leaf PCR Mix的基礎上用dUTP替代了dTTP，并同時加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(racil-N-glycosylase)。在PCR反應前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產物，UNG酶對不含有尿嘧啶的模板不會造成任何影響，從而保證擴增的特異性和準確性，防止了大規模基因檢測時可能出現的PCR產物污染問題。

D-Taq DNA polymerase是為直接PCR反應專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對多種PCR反應抑制劑具有極強的的耐受性、在各種復雜反應體系中均能高效擴增痕量的DNA，擴增速度可達2Kb/min，特別適合進行直接PCR反應。

根據植物樣本差異，該產品分為兩個大類：植物直接PCR試劑盒(Plant Leaf Direct PCR Kit)和多糖多酚植物直接PCR試劑盒(Plant LeafDirect PCR Plus Kit)；在PCR檢測階段，可以根據實驗需求，選用普通的2× Leaf PCR Easy^TM Mix或是具有防PCR擴增產物污染作用的2× Leaf PCR Easy^TM Mix(UNG)。

試劑盒應用

適用范圍：多種植物葉片。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉基因植株鑒定、植物基因分型等。

試劑盒局限性

擴增片段≤1kb；超過1kb，擴增效率下降或者擴增失敗。

UNG防PCR產物污染體系得到的PCR產物請勿用于基因克隆或測序。

PCR產物3’末端隨機加A尾。

試劑盒內容

Buffer PS1：提供植物葉片裂解反應所需的環境。

Buffer PS2：補充提供多糖多酚植物葉片裂解反應所需的環境。

Buffer P2：中和裂解產物，使其不影響后續PCR反應。

2× Leaf PCR Easy^TM Mix(UNG)：在2× Leaf PCR Easy^TM Mix的基礎上用dUTP替代了dTTP，并同時加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶，從而能夠有效防止PCR擴增產物污染。包含福際生物特別改造的D-TaqDNA Polymerase、UDG、dNTPs、MgCl₂、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR反應時，只需將適當的裂解混合液、引物、ddH₂O添加到2×Leaf PCR Easy^TM Mix(UNG)中即可用于PCR反應。

6× DNA Loading Buffer：該Loading Buffer中不含有SDS。建議在進行瓊脂糖凝膠電泳時，配搭使用試劑盒附贈的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否則在電泳時會在泳道中有一大團拖尾亮光，影響實驗結果。

儲存條件

全程低溫冰盒運輸，保證試劑盒Part I、Part II處于＜4℃狀態。

本試劑盒Part I保存在2-8℃。

v 試劑Buffer PS1、Buffer P2、6× DNA Loading Buffer在干燥條件下，可保存12個月；如需保存更長時間可置于2–8℃。

本試劑盒Part II保存在-20℃。

v  試劑Buffer PS2、2× Leaf PCR Easy^TM Mix(UNG)，在-20℃條件下可保存12個月；若頻繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天內用完)。

操作流程