該(gai)試劑盒采用第三代RNA提取技(ji)術：簡便、快捷、安全，極大(da)的提升實驗質量和效率。
整(zheng)套試劑盒全(quan) RNase-Free，無(wu)需(xu)擔心 RNA 降解。
RNA 得率高：RNA-only Column 和獨特配(pei)方搭配(pei)能高效(xiao)的純化(hua) RNA。
DNA-Cleaning Column：無(wu)需(xu)DNase，能輕松(song)有效的(de)去除(chu)DNA污染(ran)。
速(su)度(du)快：操作(zuo)簡便(bian)，可在 20 分鐘內(nei)完成
安 全(quan)：無需(xu)有機試劑抽提。
質(zhi)量高：提取得到(dao)的 RNA 片段純度(du)高，沒有蛋白和其他(ta)雜質(zhi)污染，能(neng)夠滿足后續各(ge)種實(shi)驗。
產 品 名 稱 | 動物組織總RNA提(ti)取試劑盒 Animal Total RNA Isolation Kit | |
貨 號 | RE-03011 | RE-03014 |
規 格 | 50T | 200T |
價(jia) 格 | ￥652.00 | ￥2,227.00 |
描 述(shu) | 快(kuai)速(su)從多種動物組(zu)織、培養細胞中純(chun)化高(gao)質量總RNA，試劑盒包含Foregene純(chun)化柱(zhu)及試劑(ji)。 | |
產品(pin)介紹(shao)
該試劑盒采用第三代RNA提取技術，可以從各種動物組織中高效率(lv)的提取得到高純度高質量(liang)的總(zong) RNA。提供(gong)高效的 DNA-Cleaning Colunm，能輕松(song)的讓上清液和組織裂解(jie)物(wu)分離并吸附(fu)除去基因組 DNA，操作簡(jian)便(bian)、省(sheng)時；該(gai) RNA-only Column 能高效的(de)結(jie)合 RNA，搭配獨特的配方，可以同(tong)時處理大量樣(yang)品。
全體(ti)系 RNase-Free，使得提(ti)取的 RNA無降解；Buffer RW1、Buffer RW2 緩沖液洗滌體(ti)系，使得(de)獲得(de)的 RNA 無蛋白、無 DNA、無離子、無有機化合物污染。
試劑盒應用(yong)
該試劑盒適用于多種新鮮或(huo)凍存的(de)動物組織(zhi)或(huo)培養細胞總RNA提(ti)取純化。
純化RNA的應用
動物組織總RNA提取試劑盒提取得到的總RNA可用于各種下游分子實驗，例如：cDNA合成(cheng)，RT-PCR、Real Time PCR、Northern Blot、Dot Blot、體外翻譯(yi)、芯(xin)片分析(xi)、PolyA篩選(xuan)、分子克隆和RNase保護分析等(deng)。
RNA提取得率和純度
使用動物(wu)組織(zhi)總(zong)RNA提取試劑盒純化(hua)得到的RNA，其產量與組(zu)織初始量、組(zu)織新鮮程度、組(zu)織保存時間以(yi)及操(cao)作相關(guan)。以(yi)下是使用該試劑盒提(ti)取RNA，各種組(zu)織其RNA得率與純度，實(shi)際操作(zuo)中，可(ke)能與該數據(ju)有些許出入。
組織類(lei)型(xing) | 總RNA產量(μg) | OD260/280 | OD260/230 |
心 | 5-20 μg/10mg組(zu)織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
肝 | 40-60 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
脾(pi) | 30-50 μg/10mg組(zu)織 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
腎(shen) | 25-35 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.7-2.0 |
腦(nao) | 3-10 μg/10mg組織 | 1.8-2.1 | 1.5-1.7 |
細胞(bao) | 10-30 μg/106細胞 | 1.8-2.1 | 1.8-2.1 |
儲存(cun)條(tiao)件
常溫(15–25℃)，有效(xiao)期(qi)為 24個月。
試劑(ji)盒內容(rong)
Buffer RL1：提供動物(wu)組(zu)織研(yan)磨(mo)裂(lie)解所需的環境(jing)。
Buffer RL2：提供 RNA 的特(te)異上柱(zhu)環(huan)境。
Buffer RW1：去除 RNA 中的蛋白質(zhi)、DNA 等雜質(zhi)。
Buffer RW2：去除 RNA 中殘留(liu)的(de)鹽離(li)子。
RNase-Free ddH2O：洗脫純化柱膜上的(de)總 RNA。
DNA-Cleaning Column：特異吸(xi)附(fu)組織裂(lie)解(jie)產物中的 DNA，并過濾除(chu)去裂解產物 中的固體雜(za)質。
RNA-only Column：特異(yi)吸附上通過 DNA-Cleaning Column 濾液(ye)中(zhong)的總(zong) RNA。
產品信息(xi)
型(xing)號 | 離心柱(zhu)型 | 純化組件 | Foregene離心(xin)柱(zhu)、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | ~20min(24個樣品) |
離心機 | 臺式離心機 | 組(zu)織裂解(jie)物(wu)分離 | 離心分離 |
純化柱RNA承載量(liang) | 160 μg | 離心柱液體盛裝(zhuang)量 | 800 μL |
洗脫體積 | 50-200 μL | 組織(zhi)樣本處理(li)量 | 組織(zhi)：10-20mg、細胞：(1-5)×106 |
操作流程
說(shuo)明書(shu)
產(chan)品文(wen)獻
TheAttenuation of Trophoblast Invasion Caused by the Downregulation of EZH2 IsInvolved in the Pathogenesis of Human Recurrent Miscarriage
Shijian Lv, Na Wang, Hong Lv,Jieqiong Yang, Jianwei Liu, Wei-Ping Li, Cong Zhang, Zi-Jiang Chen
上海市輔(fu)助(zhu)生(sheng)(sheng)殖與生(sheng)(sheng)殖遺傳學重點實(shi)驗室
MolecularTherapy-Nucleic Acids ( IF 5.66 ) PubDate : 2018-12-21, DOI：10.4454/jpp.v98i3.3764
文(wen)章鏈接(jie)：
Dysfunction ofDNA damage-inducible transcript 4 in the decidua is relevant to thepathogenesis of preeclampsia
Jieqiong Yang, Yachao Zhang, JingTong, Hong Lv, Cong Zhang, Zi-Jiang Chen
Biology ofReproduction ( IF 3.184 ) PubDate : 2018-02-13 , DOI：10.1093/biolre/ioy038
上海交通大學(xue)醫學(xue)院仁濟醫院生殖(zhi)醫學(xue)中心(xin)
輔助生殖(zhi)與生殖(zhi)遺傳學重點(dian)實驗室
文章鏈接：
Chitosan-DNA nanoparticles enhanced the immunogenicity ofmultivalent DNA vaccination on mice against Trueperella pyogenes infection
Ting Huang, Xuhao Song, Jie Jing, KeleiZhao, Yongmei Shen,Xiuyue Zhang and Bisong Yue Contributed equally
四川大學(xue)(xue)生命科學(xue)(xue)學(xue)(xue)院生物資源與(yu)生態環境教育部重點(dian)實(shi)驗(yan)室
Journal of Nanobiotechnology ( IF 5.294 ) PubDate : 2018-01-29 , DOI：10.1186/s12951-018-0337-2
文(wen)章鏈接：
Downregulation of decidual SP1 and P300 is associated withsevere preeclampsia
Yachao Zhang, Jieqiong Yang, Shijian Lv1, Dong-Qin Zhao,Zi-Jiang Chen, Wei-Ping Li and Cong Zhang
上海市(shi)輔(fu)助生殖與(yu)生殖遺(yi)傳學重點(dian)實驗室山東(dong)師范大學生命科(ke)學學院
山東省動物耐藥生物學(xue)重點實驗室
Journal of Molecular Endocrinology ( IF 3.297 ) PubDate : 2018, DOI：10.1530/JME-17-0180
文章鏈接(jie):
BMAL1 facilitates trophoblast migration and invasion viaSP1-DNMT1/DAB2IP pathway in recurrent spontaneous abortion
Shang Li, Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Yan Hong, Weixiu Zhao,Aimin Zhao, Kang Sun, Yanzhi Du, Zi-Jiang Chen
上海市輔助生殖與(yu)生殖遺傳學重點實驗室
Oncotarget ( IF 5.168 ) PubDate : 2017-09-01, DOI：10.18632/oncotarget.20702
文章鏈接:
Zinc finger gene 217 (ZNF217) Promoted OvarianHyperstimulation Syndrome (OHSS) through Regulating E2 Synthesis and InhibitingThrombospondin-1 (TSP-1)
Junyu Zhai, Jiansheng Liu, Xiaoyue Cheng, Shang Li, YanHong, Kang Sun, Zi-Jiang Chen, Yanzhi Du & Weiping Li
上海市(shi)輔(fu)助(zhu)生殖(zhi)與生殖(zhi)遺傳學重點實驗室
Scientific Reports ( IF 4.259 ) PubDate : 2017-06-12, DOI：10.1038/s41598-017-03555-6
文章(zhang)鏈接(jie)：
Regulatory network of GATA3 in pediatric acutelymphoblastic leukemia
Qianqian Hou, Fei Liao, Shouyue Zhang, Duyu Zhang, YanZhang, Xueyan Zhou, Xuyang Xia, Yuanxin Ye, Hanshuo Yang, Zhaozhi Li, LeimingWang, Xi Wang, Zhigui Ma, Yiping Zhu, Liang Ouyang, Yuelan Wang, Hui Zhang, LiYang,Heng Xu, Yang Shu
四川大(da)學華西醫院精準醫療中心
四川(chuan)省精(jing)準醫療(liao)重點實(shi)驗(yan)室(shi)四川(chuan)省生(sheng)物治療(liao)國家重點實(shi)驗(yan)室(shi)
Oncotarget ( IF 5.168 ) PubDate : 2017-03-21, DOI：10.18632/oncotarget.16424
文章(zhang)鏈接(jie)：
Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesisin human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS
Jiaou Zhang, Jiansheng Liu, Kai Zhu, Yan Hong, Yun Sun.Xiaoming Zhao. Yanzhi DuZi-Jiang Chen
Endocrine ( IF 3.279 ) PubDate : 2016-08-27 , DOI：10.1007/s12020-016-0961-2
上海市輔(fu)助生殖(zhi)與生殖(zhi)遺傳學重(zhong)點(dian)實(shi)驗室
文(wen)章鏈接：
Dysfunction of Liver Receptor Homolog-1 in Decidua:Possible Relevance to the Pathogenesis of Preeclampsia
Dongmei Zhang, Dong Cheng, Tao Liu, Yachao Zhang, Zi-JiangChen, Cong Zhang
上海市(shi)輔助生殖與生殖遺傳學重點實驗室
山東師(shi)范(fan)大學生(sheng)命科學學院動物(wu)耐(nai)藥(yao)性(xing)研(yan)究重點(dian)實(shi)驗室(shi)
Plos One ( IF 3.234 ) PubDate: 2015-12-30, DOI：10.1371/journal.pone.0145968
文(wen)章鏈接(jie)：
MSDS
COA
提取不到(dao)RNA或者RNA產量低
Answer
通常會(hui)有多(duo)種因素影響(xiang)回(hui)收效率，比如：組織樣本(ben)RNA含量、操(cao)作方法、洗脫體積等。
1. 操作過程中進行了冰浴(yu)或(huo)低(di)溫(4°C)離(li)心(xin)。
建議：全程常溫(15-25°C)操(cao)作，切勿冰浴和低溫離心。
2. 樣本保(bao)存不當或樣本保(bao)存時(shi)間過久。
建議：樣本保存于-80℃或凍存于液氮中，并避免反復凍融使用；盡量采用新鮮組織或培養的細胞進行RNA提取操作。
3. 樣(yang)本(ben)裂解不充(chong)分。
建議：在組織(zhi)勻漿時，請保(bao)證組織(zhi)充(chong)分(fen)勻漿，組織(zhi)細(xi)胞都被充(chong)分(fen)裂解(jie)釋放RNA。
4. 洗脫液添加不正(zheng)確。
建議(yi)：確認RNase-Free ddH2O滴(di)加到了純化柱膜中間(jian)位置。
5. Buffer RL2或Buffer RW2中沒(mei)有添加正確體積的無水乙醇。
建議：請按照說明(ming)書(shu)，在試劑盒(he)使用前，Buffer RL2和Buffer RW2中添加(jia)正確體積的無水乙醇并混(hun)勻。
6. 組織樣(yang)本用量不合適(shi)。
建議：每500μl Buffer RL1使用(yong)組織量10-20mg或(1-5)×106個(ge)細胞，組織使用過多(duo)會(hui)導(dao)致RNA提取量降低。
7. 洗脫(tuo)體積不合適或洗脫(tuo)不徹底。
建(jian)議：純(chun)化柱的洗脫液體積為50-200μl；若(ruo)洗(xi)脫效果并不理想，建議在(zai)加入預熱(re)的RNase-Free ddH2O后，延長室溫放(fang)置的(de)時間，例如放(fang)置5-10min。
8. 純化柱(zhu)在Buffer RW2洗滌之后有乙醇(chun)殘留。
建(jian)議：如(ru)果(guo)在Buffer RW2洗滌，空管(guan)離心1min后還有乙醇殘留，可以將空管離心操(cao)作的時間(jian)增加至2min，或將純化柱置于(yu)室溫(wen)5min，以充分除去殘留乙醇。
純化獲得(de)的RNA有降(jiang)解(jie)
Answer
純化得到的RNA的質(zhi)量和(he)樣本(ben)的保存(cun)、RNase污染、操作等因素(su)有關。
1. 組(zu)織樣本(ben)沒有及時保存。
建議：組織(zhi)樣本或者細胞(bao)在收集后(hou)若不及時使用，請立即低溫保(bao)存于(yu)-80℃或者(zhe)液氮(dan)中。提取RNA請盡(jin)量使(shi)用新近采取(qu)的(de)組織或(huo)細胞樣本。
2. 組織樣(yang)本反復(fu)凍融。
建(jian)議：組織樣(yang)本保(bao)存(cun)時(shi)，最(zui)好切成小(xiao)塊(kuai)保(bao)存(cun)，使用時(shi)取出(chu)其中一塊(kuai)即可(ke)，避免樣(yang)本的反復凍融導致RNA的(de)降(jiang)解。
3. 操作間有RNase引入或沒有佩戴一(yi)次性手套、口(kou)罩(zhao)等。
建議：RNA提取實驗(yan)最好在單獨的RNA操(cao)作間進行(xing)，并在實驗前清理好實驗桌，實驗時佩戴(dai)一次性手套、口罩，最大程(cheng)度(du)上避免RNase引入導致的(de)RNA降解。
4. 試(shi)劑(ji)在使用過程中被RNase污(wu)染(ran)。
建議：更換(huan)新的(de)Animal Total RNAIsolation Kit進行相關實驗。
5. RNA操作時所用(yong)的離心管(guan)、槍頭(tou)等有RNase污染。
建議(yi)：確(que)認RNA提取時所用到的(de)離心(xin)管、槍(qiang)頭、移(yi)液器等都是RNase-Free。
純化獲得(de)的RNA影響下游實驗
Answer
經純化柱純化的RNA，如果(guo)鹽離(li)子、蛋白質(zhi)含量過多會影(ying)響下游實驗，比如：逆轉錄、Northern Blot等。
1. 洗脫后的RNA有(you)鹽離子殘留(liu)。
建議：確認(ren)Buffer RW2中添加(jia)了(le)正確體積(ji)的乙醇，并按(an)操作說(shuo)明的離心轉速進行2次純化(hua)柱洗滌(di)；如果(guo)還有鹽離(li)子殘留(liu)，可(ke)在(zai)純化(hua)柱加入Buffer RW2后(hou)，室溫放(fang)置(zhi)5min，再進行離(li)心操作，以最(zui)大程度(du)上去除鹽離(li)子污染。
2. 洗(xi)脫后(hou)的(de)RNA有乙醇殘(can)留。
建(jian)議：確認Buffer RW2洗滌后，按操(cao)作說明的(de)離(li)心(xin)(xin)轉速進行空(kong)管離(li)心(xin)(xin)操(cao)作；如果還有(you)乙醇殘留，可(ke)以將空(kong)管離(li)心(xin)(xin)操(cao)作的(de)時間(jian)增加(jia)至2min，或者(zhe)在空管(guan)離心后(hou)在室溫放(fang)置5min，以最大程(cheng)度上去(qu)除(chu)乙(yi)醇殘留。
采用(yong)第三(san)代(dai)RNA提取技(ji)術，無需使用(yong)DNase，快速從各(ge)種細胞中高效率提取獲得(de)高質(zhi)量(liang)的(de)總RNA。
采用第三代(dai)RNA提(ti)取技術，無需使(shi)用DNase，快(kuai)速的從多糖多酚(fen)植(zhi)物(wu)組織中高效(xiao)率提(ti)取高質量(liang)的總 RNA。
采(cai)用第三代RNA提(ti)取技(ji)術，無需使用DNase，快速從植物(wu)樣本(多糖多酚含量(liang)(liang)低(di))中提(ti)取獲得高質量(liang)(liang)的總RNA。
